Метод измерения глюкозы основан на специфическом окислении глюкозы с помощью фермента глюкозооксидазы. Образовавшаяся при этом перекись водорода разлагается вторым ферментом, пероксидазой, и окисляет добавленный краситель. Изменение цвета красителя при окислении будет свидетельствовать о присутствии глюкозы в моче. Поэтому, чтобы получить какие-то сведения о наличии сахара в моче, бумажку «Глюкотеста» следует погрузить в испытуемую мочу так, чтобы желтая полоска вся оказалась смоченной. Бумажку необходимо немедленно извлечь из мочи и сравнить цвет ее с эталоном цветов, который прилагается вместе с инструкцией. Если цвет бумажки остался прежним, светло-желтым, то сахара в моче нет. Если же цвет бумажки изменился на ярко-зеленый, то сахара в моче больше 2 %. По «Глюкотесту» можно определить сахар в диапазоне 0,1–2 %.