Сотрудничество с московскими клубами аквариумистов и многими любителями экзотических рыб показало, что заразные и незаразные болезни имеют широкое распространение в комнатных водоемах и довольно часто приводят к массовой гибели рыб.

Выбор эффективного метода лечения в первую очередь зависит от правильно поставленного диагноза. Однако при диагностике болезней рыб аквариумисты используют, как правило, два метода исследований: метод клинического осмотра рыбы и менее распространенный — метод гидрохимических исследований. Причем аквариумную воду исследуют в основном на два показателя: концентрацию водородных ионов (рН) и жесткость. Исключение составляют государственные рыборазводни системы Зоокомбината и Министерства рыбного хозяйства СССР, которых обслуживают городские ветеринарные лаборатории, имеющие в штате ветеринарных врачей по болезням рыб, способных провести весь комплекс лабораторно-диагностических исследований.

В ихтиопатологии диагностика болезней аквариумных рыб заключается в проведении целого ряда исследований, из которых одни считаются основными и обязательными (минимум), другие — дополнительными, помогающими установлению правильного диагноза в спорных случаях. К основным методам лабораторно-диагностических исследований относят клинический осмотр, патологоанатомические, паразитологические, микробиологические, биологические (биопробы) и гидрохимические исследования. Гидрохимические исследования описаны в разделе «Нарушение газового и солевого состава воды».

Дополнительные диагностические исследования включают следующие методы: вирусологические, гистологические, гематологические, биохимические и химико-токсикологические. Эти методы из-за сложности и продолжительности их проведения используют в основном в научно-исследовательских институтах. В ветеринарных лабораториях к ним прибегают в редких случаях, когда постановка диагноза требует обязательного их проведения.

 

Клинический осмотр

Если в прудовых хозяйствах и естественных водоемах рыбное стадо постоянно скрыто от глаз наблюдателя, а врач-ихтиопатолог, рыбовод и ихтиолог чаще всего встречаются со значительными отклонениями от нормы в поведении рыб (признаки асфиксии, подход рыбы к притоку, движение ее в зимовальных прудах, плавание на боку или вверх брюхом и т. д.), то рыбоводы-селекционеры и любители-аквариумисты имеют исключительно благоприятные условия для постоянного наблюдения за поведением и физиологическим состоянием своих питомцев — экзотических рыб.

Любая болезнь гораздо легче поддается лечению в начальной стадии. Поэтому своевременно замеченные малейшие отклонения от нормального физиологического состояния рыбы, незначительные изменения внешних покровов ее тела в значительной мере способствуют ранней диагностике заболевания. Благодаря этому удается выявить и изолировать больных рыб и тем самым предупредить распространение заразной болезни и возможность гибели всего населения аквариума.

С целью выявления больных рыб каждый рыбовод-селекционер и аквариумист должен ежедневно тщательно осматривать всех рыб, содержащихся в аквариумах.

Характерными признаками заболевания являются: отказ рыбы от корма, побледнение окраски тела, отделение стайных рыб от стаи, нарушение координации движений, учащенное жаберное дыхание, потеря реакции на внешние раздражители (приближение сачка и других предметов). Рыбы, ведущие придонный образ жизни, плавают у поверхности воды или, наоборот, держатся в углах аквариума, принимая при этом вертикальное положение (головой вниз или вверх), или совершают круговые движения. Иногда рыбы проявляют беспокойство, выражающееся в почесывании о грунт, водные растения и другие предметы, расположенные в аквариуме. Это свидетельствует о наличии эктопаразитов на поверхности их тела и жабрах. Змеевидное покачивание всем телом указывает на заболевания, причиной которых являются низкая температура воды или эктопаразиты.

Рыб, у которых выявлены описанные выше отклонения, отлавливают из общего аквариума и помещают в отдельный сосуд-изолятор, продолжая наблюдение за ними. Часть из них отправляют на исследование в ветеринарную лабораторию.

Поступившую на исследование в лабораторию живую рыбу немедленно осматривают, предварительно определив ее вид, возраст, пол и размер (по возрасту и размеру можно судить о ее физиологическом развитии). Осматривают кожный покров, плавники, по возможности ротовую полость, обращая внимание на пигментацию, различного рода наложения, гиперемию, кровоизлияния, некрозы, абсцессы, язвы, рубцы, орошение чешуи, асцит, состояние анального отверстия и т. д.

Изменения в пигментации поверхности тела рыб бывают при авитаминозах и других нарушениях обмена веществ, а также при некоторых инфекционных заболеваниях.

При некоторых заболеваниях (хилодонеллезе, костиозе, триходинозе, гиродактилезе) на кожном покрове рыб появляется слизистый беловато-матовый налет, иногда с голубоватым оттенком, состоящий из слизи и эпителиальных клеток. Такие же изменения обнаруживают при простуде и воздействии на кожу раздражающих веществ, растворенных в воде.

Серовато-белые округлые или плоские наросты на кожном покрове и плавниках наблюдают при лимфоцистозе.

При ихтиофтириозе, оодиниумозе, узелковой и других болезнях на поверхности тела рыб образуются различного цвета бугорки, содержащие внутри инфузорий, жгутиконосцев или споровиков и их споры.

Дерматомикоз сопровождается образованием на различных частях тела рыбы ватообразного налета беловатого или сероватого цвета.

Покраснение и геморрагическое воспаление кожного покрова и плавников наблюдается при некоторых инфекционных болезнях, при воздействии растворенных в воде раздражающих веществ, при укусах ихтиофагов (водяных жуков и их личинок, водяных клопов) и эктопаразитов (пиявок, рачков аргулусов, лерпий), при ушибах, ранениях (травмах) во время пересадок и перевозок рыб.

Некротический распад межлучевых перепонок плавников бывает при инфекционной гнили плавников, оодиниумозе, ихтиофтириозе, ихтиоспоридиозе и гиродактилезе. Разрушение чешуи и жаберных крышек возникает при лернеозе и нарушениях обмена веществ.

Абсцессы, язвы, рубцы на теле рыб наблюдаются при микобактериозе, ихтиоспоридиозе, язвенной болезни, а также в результате внедрения и развития секундарной инфекции на месте травм и ранений, нанесенных ихтиофагами и эктопаразитами.

Такие признаки, как ерошение чешуи, экзофтальмия (пучеглазие) и брюшная водянка, одновременно или по отдельности встречаются при микобактериозе, ихтиоспоридиозе, почечной форме сангвиниколеза.

Побледнение жабр, чередование ярко-красных и белых участков, различного рода наложения, кровоизлияния, слипание и срастание жаберных лепестков наблюдаются при бранхиомикозе, ихтиофтириозе, костиозе, жаберной форме сангвиниколеза, дактилогирозах, а также при воздействии различных растворенных в воде раздражающих химических веществ и токсинов.

При осмотре глаз можно обнаружить увеличение и покраснение глазного яблока, выпячивание его из орбиты (экзофтальмия), помутнение хрусталика и роговицы. Эти признаки весьма характерны для заболевания рыб диплостоматозом, микобактериозом и ихтиоспоридиозом.

Установление диагноза по одним только клиническим признакам болезни недопустимо. Для этого необходимо провести один или несколько исследований, описанных ниже. Исключение составляют ихтиофтириоз, оодиниумоз, дерматомикоз, а также механические повреждения, нанесенные рыбе самим исследователем.

Диагностика этих заболеваний по одним клиническим признакам доступна только врачам-ихтиопатологам, рыбоводам-селекционерам и аквариумистам с большим стажем работы с экзотическими рыбами.

 

Патологоанатомические методы исследования

Патологоанатомическое исследование начинают с осмотра брюшной полости, обращая внимание на ее содержимое, положение и внешний вид органов.

В брюшной полости при патологических процессах часто можно обнаружить жидкости различного происхождения (транссудат, экссудат и др.) и газы. Жидкость характеризуют в отношении количества, цвета, прозрачности (прозрачная или мутная, хлопьевидная), консистенции, различных примесей и запаха.

После окончания исследования содержимого брюшной полости необходимо получить представление о положении органов и о их виде. Обращают внимание на состояние брюшины, которая в норме должна быть гладкой, блестящей. При патологических процессах в ней можно обнаружить общее или местное изменение окраски, кровоизлияния, различные наложения (фибрин, гном и др.), паразитарные бугорки, туберкулы. При осмотре и извлечении органов можно найти спайки или сращения.

Печень. Осмотром устанавливают ее форму и величину, цвет, консистенцию (плотная, мягкая, дряблая), гиперемию или анемию, кровоизлияния, наличие туберкул и цист.

Желчный пузырь. Определяют степень его наполнения, характер желчи (цвет, консистенцию, прозрачность), состояние внутренней оболочки.

Селезенка. Отмечают ее величину, форму, консистенцию (плотная, мягкая, дряблая), цвет, наличие на ней наложений, рубцов. После внешнего осмотра селезенку разрезают и определяют состояние пульпы, ее цвет, наличие некротических участков, кровоизлияний, гнойных и творожистых очагов.

Желудочно-кишечный тракт. Освобождают от печени и жира брюшную полость и вскрывают желудочно-кишечный тракт ножницами. При этом обращают внимание на ширину просвета, количество и характер содержимого различных отделов (консистенцию, цвет, запах, наличие паразитов). Затем кишечник промывают в воде и детально осматривают слизистую оболочку (цвет, отмечают набухание, отечность, истончение, кровоизлияния, наложения, язвы, рубцы, перфорации).

Гонады. Определяют форму, цвет, консистенцию, стадию зрелости.

Плавательный пузырь. Отмечают форму, величину, состояние оболочек, наличие кровоизлияний и характер содержимого (количество, цвет, прозрачность, консистенция).

Почки. Обращают внимание на форму, вид поверхности, состояние капсулы, консистенцию, степень кровенаполнения, равномерность или пятнистость окраски.

Сердце. Сердце у рыб заключено в сердечную сорочку и отделено от органов брюшной полости соединительнотканной перегородкой. Исследование сердца начинают со вскрытия сердечной сорочки, обращая внимание на цвет, прозрачность, количество, консистенцию заключенной в полости жидкости и состояние серозного листка сорочки (цвет, прозрачность, наличие спаек или сращений). По окончании осмотра полости сердечной сорочки переходят к сердцу, отмечают его размеры, форму, степень наполнения полостей, консистенцию сердечной мышцы. После внешнего осмотра вскрывают полость сердца и отмечают количество и характер содержимого (жидкая кровь, сгустки).

Головной мозг. Вскрывают черепную коробку, удаляют жир, расположенный между костями черепа и головным мозгом, и приступают к исследованию. Обращают внимание на состояние оболочек головного мозга (гиперемия, кровоизлияния) и консистенцию мозгового вещества.

Результаты исследований регистрируют в соответствующем журнале. При обнаружении в отдельных органах и тканях отклонений от нормы подробно описывают увиденную патологоанатомическую картину.

 

Паразитологические методы исследования

Паразитологическому исследованию необходимо подвергать живых или свежеуснувших рыб всех возрастных категорий.

Рыб вскрывают по методу, разработанному К. И. Скрябиным и модифицированному применительно к рыбам В. А. Догелем и Э. М. Ляймапом. (Техника вскрытия рыбы описана в разделе «Микробиологические методы исследования».)

Органы и ткани рыб исследуют в следующем порядке: кожа, плавники, ротовая полость, жабры, глаза, кровь, сердце, брюшная полость, печень, мочевой пузырь, половые органы, кишечник, мышцы, головной и спинной мозг.

Результаты исследования вносят в рабочий журнал, где указывают дату исследования, пол, возраст, длину рыбы, результаты паразитологического исследования с предварительным и окончательным определением вида паразитов.

Внешний покров. При наружном осмотре кожного покрова и плавников собирают, предварительно определяют и фиксируют для последующего изучения всех паразитов, видимых простым глазом (паразитические ракообразные, пиявки и др.). После этого приступают к микроскопии мазков из соскобов со всей поверхности тела или из нескольких участков (крупные рыбы). Скальпелем соскабливают слизь с кожного покрова и плавников, помещают ее на предметное стекло и смешивают с ранее нанесенными туда же 2–3 каплями прокипяченной и остуженной воды. Накрывают покровным стеклом и рассматривают сначала под лупой, а потом при малом увеличении микроскопа. Исследование рыб па возбудителя костиоза ведут при среднем и большом увеличении микроскопа. Кроме возбудителя костиоза, на коже рыб паразитируют другие жгутиконосцы, а также инфузории, моногенетические сосальщики, паразитические рачки. Весьма часто на них можно обнаружить споровиков, локализующихся в дермальных бугорках.

Крупных паразитов (рачков, гельминтов) подсчитывают в абсолютных числах, а мелких (споровиков, инфузорий и других простейших) — в относительных, то есть подсчитывают число паразитов в десяти полях зрения микроскопа и определяют средние показатели. При этом высчитывают по каждому паразиту в отдельности экстенсивность и интенсивность инвазии для каждого вида и возраста рыб.

В случае затруднения видового определения тех или иных паразитов их необходимо консервировать в соответствующих жидкостях и сохранять для дальнейшей камеральной обработки. На склянку обязательно наклеивают этикетку.

Жабры. Все жаберные дуги вынимают, помещают на предметное стекло, собирают всех видимых паразитов, их подсчитывают и фиксируют.

Соскоб с жаберных лепестков или целые жаберные дуги с несколькими каплями воды зажимают между двумя предметными стеклами так, чтобы они стали прозрачными, и исследуют при малом увеличении микроскопа.

Споровики, некоторые инфузории и личинки сосальщиков могут находиться не на поверхности жаберных лепестков, а в, особых соединительнотканных образованиях (бугорках); обнаружить и извлечь их можно только после разрыва стенки бугорка при помощи препаровальных игл. В кровеносных сосудах жабр могут находиться яйца сангвиникол, споры и мицелии гриба.

Глаза. Для обнаружения паразитов глаза извлекают из глазных впадин, помещают на предметное стекло и вскрывают острыми ножницами с внутренней каудальной стороны. Извлеченное стекловидное тело, хрусталик и содержимое передней камеры глаза компрессируют между двумя предметными стеклами и просматривают при малом увеличении микроскопа. В глазах можно обнаружить личинки сосальщиков рода Diplostomulum.

Кровь. Каплю крови наносят на обезжиренное предметное стекло, вносят для предотвращения свертывания немного 1 %-ного раствора лимоннокислого натрия, покрывают покровным стеклом и исследуют под микроскопом. Для предотвращения высыхания крови края покровного стекла обмазывают вазелином. Одновременно несколько мазков крови высушивают на воздухе, фиксируют в метиловом спирте, окрашивают по Романовскому — Гимза или гематоксилином и также исследуют под микроскопом.

Брюшная полость. Брюшную полость вскрывают по методике, изложенной в разделе «Микробиологические методы исследования», с той только разницей, что при паразитологическом исследовании нет необходимости соблюдать условия стерильности. Дугообразный разрез к основанию левого грудного плавника начинают от анального отверстия, вводя непосредственно в него тупой конец одной из бранш ножниц. Вскрытую брюшную полость осматривают, а имеющиеся на серозных покровах и брыжейке бугорки исследуют под микроскопом.

Сердце. Для исследования сердце помещают в бактериологическую чашку с физиологическим раствором, вскрывают его полости, промывают и образовавшийся осадок исследуют под микроскопом на наличие возбудителя сангвиниколеза.

Печень. Чтобы обнаружить паразитов, обитающих в печени, ее делят на небольшие кусочки, которые компрессируют и исследуют под лупой и затем при слабом увеличении микроскопа.

Желчный пузырь. Для обнаружения паразитов желчный пузырь вырезают, помещают на предметное стекло, разрезают ножницами, делают соскоб с внутренней оболочки стенки пузыря. Соскоб и сам желчный пузырь помещают между двумя предметными стеклами и исследуют под лупой и микроскопом. В желчном пузыре можно обнаружить простейших и сосальщиков.

Селезенка. Селезенку помещают между двумя стеклами, сжимают до прозрачности и исследуют под микроскопом.

Почки. Для обнаружения паразитов почки компрессируют и исследуют под микроскопом. В почках можно найти споровиков и яйца сосальщиков.

Плавательный пузырь. В случае необходимости соскоб с внутренней оболочки плавательного пузыря можно исследовать под микроскопом компрессорным методом.

Мочевой пузырь. Методика исследования сходна с исследованием желчного пузыря. В мочевом пузыре можно обнаружить сосальщиков, споровиков и инфузорий.

Половые органы. Для обнаружения паразитов железу по частям компрессируют между стеклами и просматривают под микроскопом.

В половых органах встречаются микроспоридии.

Желудочно-кишечный тракт. Пищевод, желудок и кишечник извлекают, освобождают от жира и печени, расправляют и вскрывают ножницами, начиная с пищевода. По ходу вскрытия обнаруженных крупных паразитов (ленточных и круглых червей, сосальщиков) извлекают и помещают в физиологический раствор. Содержимое из различных отделов желудочно-кишечного тракта исследуют компрессорным методом под микроскопом. Затем с помощью скальпеля делают глубокий соскоб со слизистой оболочки из нескольких мест и исследуют на наличие микроскопических паразитов (октомитус).

Мышцы. Чтобы обнаружить мелких паразитов, берут небольшие кусочки мышц из различных частей тела и исследуют компрессорным методом под лупой и под микроскопом при малом увеличении. В мышцах можно обнаружить споровика плистофору и его споры.

Головной и спинной мозг исследуют компрессорным методом. В этих органах можно обнаружить споровиков.

Методы окраски. Мазки крови па наличие кровепаразитов окрашивают азур-эозином по Романовскому — Гимза (0,8 г азура II, 3 г эозина, 250 мл химически чистого глицерина и 250 мл метилового спирта) или метиленовой синью по Машковскому (1 г метиленовой сини и 2,5 г буры растворяют в 100 мл горячей воды).

Готовую, имеющуюся в продаже краску Романовского перед окрашиванием разводят из расчета 2–3 капли на 1 мл нейтральной дистиллированной воды. Если готовая краска отсутствует, ее можно приготовить самим. Для этой цели 1 г азура II растворяют в 1 л прокипяченной дистиллированной воды (раствор № 1) и 1 г эозина — в 1 л воды (раствор № 2). Оба раствора хранят отдельно. Перед употреблением на 1 мл нейтральной дистиллированной воды прибавляют по две капли каждого раствора. Продолжительность окраски 20–40 минут. Эритроциты окрашиваются в красный или розовый цвет, протоплазма паразитов и лейкоцитов — в синий, ядра паразитов — в красный, а лейкоцитов — в фиолетовый.

Раствор метиленовой сини перед употреблением разводят дистиллированной водой 1:10 и окрашивают мазки в течение 30 секунд, затем промывают водой и дифференцируют в течение нескольких секунд 5—10 %-ным водным раствором танина. Эритроциты получаются красновато-фиолетовые, протоплазма простейших кровепаразитов — ярко-голубая, ядра лейкоцитов — фиолетовые.

Для изучения морфологии паразитических инфузорий применяют окраску железным гематоксилином по Гейденгайну (протрава 2–2,5 %-ным раствором сернокислых железо-аммиачных квасцов — 1–2 часа, окраска их 1 %-ным спиртовым раствором гематоксилина в течение нескольких часов и дифференциация 1 %-ным раствором 5—10 минут). Окрашивать инфузории можно также гематоксилином Делафильда или квасцовым кармином.

Паразитических жгутиконосцев окрашивают железным гематокслином или по Романовскому — Гимза.

Слизистых споровиков окрашивают 1 %-ным водным раствором метиленовой сини 30–60 минут, затем препарат промывают в воде, последовательно проводят через спирты возрастающей крепости (70, 80, 96°-ный и абсолютный) и просветляют ксилолом.

Трематод и цестод окрашивают квасцовым кармином. Фиксированные в спирте препараты промывают в течение нескольких часов в проточной или часто сменяемой воде, затем помещают в краску (от 1 минуты до нескольких часов в зависимости от толщины гельминта). Продолжительность окраски можно контролировать, исследуя препараты под микроскопом. Окрашенные препараты переносят в дистиллированную воду, где в течение нескольких минут тщательно промывают от краски. Отмытых от краски паразитов осторожно сушат фильтровальной бумагой и проводят через спирты возрастающей крепости (70, 80, 96°-ный), выдерживая в них несколько часов. Обезвоженных паразитов просветляют гвоздичным маслом и ксилолом.

Цестод, так же как и трематод, можно окрашивать гематеином Майера (1 г гематеина растворяют в 1 л дистиллированной воды с последующим добавлением 0,2 г йодноватокислого натрия и 50 г калийных квасцов). Гематеин допускает как прогрессивное, так и регрессивное окрашивание (без дифференцировки или с ней). При прогрессивном способе красят только 30 минут, при регрессивном — в течение 24 часов. Во втором случае для дифференциации препарат обрабатывают в 1 %-ном солянокислом спирте под контролем микроскопа с последующим тщательным отмыванием краски в проточной воде в течение 20–30 минут.

Хорошие результаты получают при окраске мелких цестод молочнокислым кармином по Блажину. Молочную кислоту разводят вдвое дистиллированной водой, добавляют в нее небольшое количество кармина (в зависимости от желаемой степени окраски) и жидкость кипятят. Красить лучше свежие, нефиксированные объекты. Продолжительность окраски контролируют под микроскопом, а в случае перекрашивания объект переносят в цельную молочную кислоту для обесцвечивания. Окрашенный препарат промывают в течение 20–60 минут водопроводной водой и помещают в бальзам.

Для окраски крупных цестод этот способ модифицирован. Цестод в течение суток промывают в проточной или часто сменяемой водопроводной воде при комнатной температуре. Затем гельминтов помещают на 4–6 часов в краску (0,3 г кармина на 100 мл 30 %-ной молочной кислоты), контролируя интенсивность перекрашивания под микроскопом, после чего на сутки их переносят в дистиллированную воду с добавлением в нее трех капель раствора сернокислого железа и двух капель 1 %-ного раствора карболовой кислоты. В дальнейшем цестод переносят на чистое большое стекло, расправляют на нем и высушивают при температуре 30–37° (не выше, иначе препарат сморщится). Высохший, очень плотно приставший к стеклу препарат заливают канадским бальзамом или канифолью, растворенной в смеси, состоящей из равных частей хлороформа и абсолютного спирта.

Паразитических рачков исследуют в той же жидкости, в которой они хранятся. Красить их не обязательно. Иногда прибегают к окраске борным кармином, эозином, сафранином.

Идентификацию паразитов производят по «Определителю паразитов пресноводных рыб СССР» (издательство АН СССР, 1962) или по схеме, приведенной в руководстве Э. М. Ляймана «Болезни рыб» (Сельхозиздат, 1963).